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          2. 產品詳情

            人臍動脈內皮細胞

            如果您對該產品感興趣的話,可以
            產品名稱: 人臍動脈內皮細胞
            產品型號: GOY-01X0973
            產品展商: 谷研
            產品文檔: 無相關文檔
            發布時間:2023-02-14

            簡單介紹

            人臍動脈內皮細胞在實驗過程中,根據要求可始終保持人臍動脈內皮細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括人臍動脈內皮細胞的形態、結構、生命活動等。


            人臍動脈內皮細胞  的詳細介紹

            下列是產品的訂購信息:

            產品名稱

            規格

            型號

            人臍動脈內皮細胞

            5×10?Cells/T25培養瓶

            GOY-01X0973

            細胞培養的優點:

            1.研究的對象是活細胞

            在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

            2.研究條件可以人為控制

            pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

            3.研究的樣本可以達到比較均一性

            通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

            4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

            采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

            細胞培養方法:

            1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

            ①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

            ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;

            ③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;

            ④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

            ⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;

            ⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

            2、細胞復蘇:

            ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。

            ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。

            3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

            ①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

            ②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養基終止消化;

            ③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

            ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

            培養操作:
            1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。換液并 檢查細胞密度。
            2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。      
                1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
                2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。  
                3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
                4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
            3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
               1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
               2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
               3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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            產品均為實驗試劑,僅供科研實驗使用,非藥品、非食品、不可用于動物及人體!

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