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          2. 新聞資訊

            人胚肺二倍體細胞;HL細胞培養操作步驟


            發布時間: 2023-09-14
            人胚肺二倍體細胞;HL細胞培養操作步驟:(供參考)

            吸走多余培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;

            吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰-酶浸沒細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態,導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞*漂浮?;靹蚣毎麜r盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)

            加入6-8ml*培養基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;

            將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養(建議T25瓶加10-12ml*培養基,10cm皿加12-15ml);傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。

            人胚肺二倍體細胞;HL冷凍保存:

            1.凍存液:92%*培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)

            2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
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